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Y1HGold酵母單雜交菌株 貨號:st086
基因型:
MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1

信息:
培養(yǎng)基:YPDA
菌株類別:酵母菌
培養(yǎng)條件:28℃,有氧,YPDA
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化:電轉(zhuǎn)
保存方式:30%甘油,-20℃
基本應用:酵母單雜交

菌株簡介:
Y1HGold菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)用菌株,MATα型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進行篩庫試驗。Transformation marker為: ura3,leu2;報告基因為:AbAr。Y1HGold -GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用:pAbAi和PGADT7。質(zhì)粒pAbAi的篩選標志為URA,用于表達 pBait-AbAi construct (1~3個bait DNA序列重復串聯(lián)后克隆到pAbAi中);質(zhì)粒PGADT7的篩選標志為LEU,用于表達AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)原理:Aureobasidin A (AbA)是一種環(huán)酯肽抗生素,在低濃度(0.1-0.2ug/ml) 下即可對酵母產(chǎn)生毒性?;蚪M中整合了pBait-AbAi 的酵母菌株(Bait-Reporter Yeast Strains),當獵物蛋白(Prey)結(jié)合到誘餌序列(Bait DNA)上,GAL4 AD就會激活AbAr 的表達,從而能夠在含有抗生素AbA的培養(yǎng)基上生長。AbAr與營養(yǎng)缺陷報告基因相比具有更低背景的優(yōu)點,可以降低酵母單雜假陽性發(fā)生的概率。在28℃有氧的條件下,Y1HGold菌株在無抗性的YPDA上生長,使用30%的甘油可保藏菌種

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